Идентификация Эргокальциферол чувствителен к воздуху, нагреванию и свету. Растворы в летучих растворителях являются нестабильными и должны использоваться немедленно. В растворах в зависимости от температуры и времени может происходить обратимая изомеризация в пре-эргокальциферол. Активность субстанции обусловлена обоими компонентами. Вещества характеризуются специфическими ИК-спектрами, поглощают в УФ-свете (Атах = 265 нм), обладают оптической активностью. Метод УФ- спектрофотометрии применим для оценки чистоты препаратов и количественного определения (холекальциферола) с использованием стандартного образца. Оценка подлинности основана на подтверждении наличия специфических функциональных групп. Так, стероидная часть молекулы обуславливает реакцию Либермана. Вещества растворяют в хлороформе, добавляют уксусный ангидрид, содержащий небольшое количество серной кислоты. После энергичного встряхивания образуется ярко-красное окрашивание,которое быстро изменяется в фиолетовое, затем синее и, наконец, зеленое. Эти изменения связаны с процессами окисления и дегидратации молекул. Специфическое испытание на холекальциферол согласно МФ проводится при растворении препарата в дихлорэтане - появляется желто-оранжевое окрашивание. В отличии от витамина D3, эргокальциферол в среде этанола при добавлении конц. серной кислоты дает красное окрашивание. Кроме того, эргокальциферол дает различные цветные реакции. С треххлористой сурьмой в хлороформе развивается оранжевое окрашивание, которое постепенно становится розовым (МФ). Эта реакция специфична и в присутствии витамина А, который с этим же реактивом дает синее окрашивание. Известны и другие нефармакопейные реакции, например, с пирогалловой кислотой, трихлоруксусной кислотой, сахарозой, ароматическими альдегидами и др. Все эти реакции могут использоваться как для качественного, так и для количественного определения (ФЭК). Витамины группы Д за счет наличия спиртового гидроксила в 3-м положении стероидного цикла образуют сложные эфиры (ацетаты, бензоаты и др.), которые характеризуются определенной температурой плавления. По ГФ РК эргокальциферол идентифицируют по ИК-спектрам в сравнении со спектрами стандартного образца. Контроль чистоты и количественное определение Примесь эргостерола (не более 0,2 %) определяют тонкослойной хроматографией: пластинка со слоем силикагеля G ; подвижная фаза: смесь из равных объемов циклогексана и эфира, свободного от пероксидов, содержащая 0,1 г/л бутилгидрокситолуола. Хроматографируют сзащитой от света немедленно после нанесения проб. Хроматограмму высушивают на воздухе итрижды опрыскивают раствором сурьмы (III) хлорида.Просматривают при дневном свете черезЗ-4 мин после опрыскивания.
RkJQdWJsaXNoZXIy MTExODQxMg==