Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) - это вариант жидкостной хроматографии, когда по колонке с сорбентом проходит подвижная фаза под высоким давлением, в которой вещества растворяются лучше и быстрее продвигаются. По ГФ РК в качестве неподвижных фаз используют: - силикагель, алюминия оксид или пористый графит, используемые в нормально-фазовой хроматографии, в которой разделение основано на разности в адсорбции и / или массовом распределении; - смолы или полимеры с кислотными или основными группами, используемые в ионно-обменной хроматографии, в которой разделение основано на конкуренции между разделяемыми ионами и ионами, находящимися в подвижной фазе; - пористый силикагель или полимеры, используемые в эксклюзионной хроматографии, в которой разделение происходит в соответствии с размерами молекул; химически модифицированные носители, приготовленные из полимеров, кремнезема или пористого графита и используемые в обращенно- фазовой ЖХ, в которой разделение основано, главным образом, на распределении молекул между подвижной и неподвижной фазами; - специальные химически модифицированные неподвижные фазы такие, как, например, целлюлоза или производные амилозы, протеины или пептиды, циклодекстрины и т.д., используемые для разделения энантиомеров (хиральная хроматография). В большинстве случаев механизм разделения основан на использовании в качестве неподвижной фазы химически модифицированного кремнезема, а в качестве подвижной фазы - полярных растворителей. На поверхности носителя, такого, как, например, кремнезем имеются силанольные группы, которые, взаимодействуя с различными силановыми реагентами, образуют ковалентно связанные силилированные производные, покрывающие различное число активных центров на его поверхности. Природа функционально привитой фазы является важным параметром, определяющим разделительные свойства хроматографической системы. Наиболее часто используют следующие функционально привитые фазы: Силикагель, являющийся носителем в обращенно-фазовых колонках, должен быть устойчивым в подвижных фазах при значении pH в области от 2.0 до 8.0 при отсутствии других указаний производителя. октил - Si - [СНз]- - СНз октадецил - Si - [С’Нт] 17- СНз фенил - Si - [СНд] - СбНз цнанопропил - Si - [СНг]з - CN аминопропил - Si - [СНз] з - NHj диол - Si - [СН2]з -О-СН(0Н)-СН2-ОН 0-СН(0Н)-СН2-0Н c s Cis СбН5 CN NH;
RkJQdWJsaXNoZXIy MTExODQxMg==