Специфические реакции Содержание серы определяют по реакции сплавления с кристаллическим едким натром тиамин разрушается с образованием сульфидов. Далее сульфид- ион определяют по реакции с ацетатом свинца. Фосфотиамин дает положительную реакцию на фосфат-ионы после растворения в разведенной азотной кислоте. Бенфотиамин и кокарбоксилаза предварительно гидролизуют кипячением в концентрированной азотной кислоте до образования фосфат-ионов, который определяют по реакции с молибдатом аммония по образованию желтого кристаллического осадка: Н3Р 04 + 12(NH4)2Mo0 4+ 2 IHNO3 ->■ (NH4)3P0 4-1 2Mo0 3 I + 2 INH4NO3 + 12Н20 Для идентификации и количественного определения препаратов используются УФ- и ИК-спектры. УФ-спектр водного раствора тиамина хлорида имеет два максимума поглощения при 237 и 262 нм, в 0,1М растворе хлороводородной кислоты - при 246 нм. УФ-спектр раствора бенфотиамина в фосфатном буфере (pH 4,9-5,1) имеет максимум поглощения при 244нм, минимум - при 225нм и точки перегиба в пределах 262 и 273 нм. Водный раствор кокарбоксилазы имеет максимум поглощения при 246 нм и плечо в интервале 255-268 нм. Контроль чистоты Тиамин и его производные принадлежат к числу очень неустойчивых соединений витаминов. Так тиамин под действием кислорода воздуха превращается в тиохром и тиаминдисульфид. Разрушение тиамина вызывают также восстановители, сильно кислая или щелочная среда, свет (особенно ультрафиолетовый), повышение температуры. В растворах тиамина значение pH не должно превышать 4. За пределами оптимальной области pH повышение температуры больше способствует разложению препарата, чем присутствие кислорода. Сопутствующие примеси в тиамине хлориде по ГФ РК определяют методом ВЭЖХ: силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографищподвижная фаза А: раствор натрия гексансульфоната, доведенный кислотой фосфорной до pH 3,1; подвижная фаза В: метанол. Сумма примесей не более 1%. Примеси:
RkJQdWJsaXNoZXIy MTExODQxMg==